什么是防水笔？

防水📔笔的基础知识

什么是防水笔？

防水笔主要用于生化实验，如免疫组化染色和其他荧光抗体反应，用于在滑动玻璃上形成防水圆圈（封闭体）包围样品。

免疫组化染色是一种利用抗体检测组织切片中蛋白质及其他抗原位置的生化技术。 在用抗体标记抗原后，使用荧光探测方法如荧光染料对抗原-抗体复合物进行可视化。 防水笔在滑玻片上形成疏水圆圈，防止抗体和样本丢失。 常见的荧光抗体方法之一是过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物（过氧化物酶抗过氧化物酶; PAP），有时也称为PAP笔。

防水笔的用途

防水笔主要用于生化实验，如免疫组化染色和INSITU杂交，这些实验主要使用显微镜玻片玻璃。

通过在样本周围写下防水圆圈，可以形成一个样本外壳，防止样本或抗体从玻片玻璃流出。 虽然它是一支“笔"，但它不适合书写普通字符，专门用于此类实验性用途。

防水笔的原理

1. 免疫组化染色方法

免疫组化染色是一种利用特定抗原-抗体反应，以特定且可重复的方式检测细胞和组织内抗原物质的技术。 这包括荧光抗体方法和酶抗体方法。

1. 标本制备

2. 抗原活化

3. 抗体染色

4. 抗体检测

免疫组化染色方法包括上述步骤。 防水笔在样品准备阶段形成防水圆圈，防止样品和试剂在后续步骤中从玻片玻璃中泄漏。

抗体标记包括直接标记和间接标记;直接标记使用酶或荧光探针直接标记的原级抗体。 间接标记同时使用了初级抗体和二级抗体。 二级抗体是特异性结合一级抗体，并用酶或荧光探针标记的抗体。 检测方法包括“通过颜色或酶检测（酶抗体法）"和“基于荧光的检测法（荧光抗体法）"。

2. 防水笔的功能

由于防水笔呈笔形，可以根据大小、形状和样品数量在滑动玻璃上绘制防水线。

防水笔的墨水具有防水性，且不溶于酒精和丙酮。 另一方面，它很容易溶解在二甲苯中，因此可以用二甲苯或其替代品去除。 大多数防水笔的耐热性可达120°C。

3. 如何使用防水笔

1. 第一次使用时，取下笔盖，笔尖朝上放在硬质表面上。 用戴手套的手指或类似工具按压笔尖，释放笔内气体。

2. 使用前一定要充分摇匀。

3. 将笔尖放在显微镜载玻片上，多次按压，直到笔尖浸透墨水。

4. 在显微镜载玻片上画出线条。

5. 把笔盖盖回去，笔尖朝下，放在室温下保存。

如果墨水流出过多，过量试剂可能会积聚在幻灯片上，因此如果墨水流出过多，就需要将其贴在不必要的纸张或类似物品上，擦拭多余的墨水。

防水笔的类型

虽然制造商不多，但防水笔由多家公司生产。 防水笔的线条厚度有2毫米、3毫米、4毫米等。

2毫米细线型的墨水容量为2.5毫升或3毫升，4毫米粗的线型为5毫升。 细线型大约可以使用500次，粗线型大约使用1000次。 墨水颜色通常为浅绿色或浅蓝色。

一般来说，如果玻璃上残留了表面活性剂，防水笔就无法发挥作用，但也有一些防水笔对含有界面活性剂的缓冲液（如Tween 20和Triton X-100）具有稳定性。