什么是细胞分拣器？

细胞分选器的基础知识 📔

什么是细胞分拣器？

细胞分选机是一种用于分离特定细胞的设备。

在近期的生物学研究中，单细胞分析的重要性日益增强，即在单细胞基础上观察生命现象。一种能够实现单细胞高通量分析的代表性技术是流式细胞术，具备分离和收集细胞功能的称为细胞分选仪。细胞分选仪与流式细胞仪类似，使用带有特定标记标记的流细胞，但仅能从中无菌将特定细胞群体分选到独立的管子中。分离和收集的细胞可以进行培养，随后进一步分析。

细胞分选器的应用

1. 概述

细胞分选机被广泛应用于处理细胞的多个研究领域，包括癌症研究、遗传学、免疫学和培养工程。 典型用途包括：

• 细胞周期分析（在特定细胞周期阶段进行分选）

• 细胞表面蛋白分析（分选表达特定表面蛋白的细胞）

• 免疫细胞分析

• 抗原特异性细胞的分类（如免疫学和疫苗研究）

• 干细胞分离与分化阶段分析，细菌和病毒分析

• 微生物组研究

• 药物筛查与药物发现中的副作用评估

2. 临床领域的应用

近年来，该技术在临床实践附近的应用不断推进。 例如，

• 利用细胞分选器，仅提取造血干细胞并移植给白血病患者。

• 在再生医学领域，诱导多能干细胞如ES细胞和iPS细胞的必要细胞进行体外分化，随后用于移植治疗和药物开发

以及更多。 在这两种情况下，只收集目标细胞都至关重要，细胞分选技术帮助分离和回收特定细胞。

细胞分选器的原理

在细胞分选仪中，激光照射到带有漂浮液体的细胞上，细胞则利用散射光进行分析，从而实现液滴分选。 以下是典型库维特流动单元类型细胞分选机的详细步骤。

1. 从流动单元释放

样品电池悬浮液首先被收集到称为流动电池的部分，然后从上到下通过非常细喷嘴（约70到100微米）滴落。 此时，使用换能器（振荡器）对流体施加垂直振动，使样品在下落过程中变成液滴。

2. 激光照射与分析

激光照射细胞，在它们变成液滴之前，每个细胞都基于散射光逐个分析。 此时，根据分拣条件，是否分离由分拣逻辑电路立即决定。

3. 分离与收集

当检测到要分离的细胞时，在细胞变成液滴前会加入一个+或-电荷，从而产生带电液滴。 带电液滴落在随后的两片极化板之间：带+电荷的液滴被吸引到负极板，而带负电荷的液滴则被吸引到正极板。 在每个极化板下方放置试管，收集细胞。 未带电的液滴垂直落下，通常会被丢弃。

根据设备不同，微板可以作为收集容器使用，使细胞能够被分离到板的每个孔中。

细胞分选机的类型

细胞分选机有多种类型。它们因产品而异，包括紧凑型桌面型、配备图像分析功能的型号，以及配备多种激光束的型号。还有下一代细胞分选机，速度比传统型号更快，提供更高的产率和纯度。

流动槽悬浮流体还有两种方法：铜球流槽法和气流射流法。在铜球流槽法中，铜球从粗矩形流动变为狭窄的圆形流动，导致湍流速度和方向变化。而气流喷射法具有快速流动的特点，流动形状和宽度不断变窄（层流）。